目錄
序
前言
**章 豬鏈球菌病 1
**節(jié) 豬鏈球菌病概述 1
第二節(jié) 豬鏈球菌病原學(xué)特征及臨床表現(xiàn) 3
一、豬鏈球菌形態(tài)特征 3
二、豬鏈球菌培養(yǎng)特征 3
三、豬鏈球菌蘭氏（Lancefiled）分群特征 4
四、豬鏈球菌血清型特征 4
五、豬鏈球菌病的臨床表現(xiàn) 5
第三節(jié) 豬鏈球菌與其他病原的混合感染 6
一、豬鏈球菌與流行菌（毒）株混合感染現(xiàn)狀 6
二、豬鏈球菌與H1N1豬流感病毒混合感染的分子機(jī)制 11
參考文獻(xiàn) 15
第二章 豬鏈球菌病的流行病學(xué) 18
**節(jié) 豬鏈球菌病的流行病學(xué)特征 19
一、血清型分型 19
二、基因型分型 20
第二節(jié) 豬鏈球菌全基因組測序與比較基因組學(xué)研究 25
一、豬鏈球菌泛基因組學(xué)研究 25
二、豬鏈球菌比較基因組學(xué)研究 28
第三節(jié) 豬鏈球菌的耐藥性及耐藥分子特性 31
一、豬鏈球菌耐藥譜 31
二、豬鏈球菌的耐藥分子機(jī)制 34
參考文獻(xiàn) 44
第三章 豬鏈球菌毒力基因篩選技術(shù) 46
**節(jié) 毒力基因篩選 46
一、體內(nèi)誘導(dǎo)抗原技術(shù)篩選毒力基因 47
二、差異蛋白質(zhì)組學(xué)篩選豬鏈球菌致病相關(guān)基因 49
第二節(jié) 鑒定黏附相關(guān)毒力因子新技術(shù)的開發(fā) 51
一、ACSP技術(shù)的建立與篩選 52
二、候選SIP的驗證 54
參考文獻(xiàn) 57
第四章 毒力相關(guān)因子的功能研究 60
**節(jié) 黏附因子功能研究 60
一、HP0197蛋白 61
二、淀粉酶結(jié)合蛋白B（Abpb）基因 69
三、M13金屬多肽酶SsPepO 71
四、其他黏附相關(guān)毒力因子 72
第二節(jié) 免疫逃避因子相關(guān)功能研究 75
一、IgA1蛋白酶 75
二、IgG結(jié)合蛋白 78
三、其他免疫逃避途徑 80
第三節(jié) 豬鏈球菌誘導(dǎo)過度炎癥的分子機(jī)制 88
一、豬鏈球菌2型促炎蛋白作用機(jī)制 89
二、樹突狀細(xì)胞促進(jìn)豬鏈球菌炎性風(fēng)暴機(jī)制的研究 110
第四節(jié) 轉(zhuǎn)錄調(diào)控相關(guān)因子功能研究 114
一、雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)resS-resR 115
二、雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)NisKR和BceRS 116
三、雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)CiaRH 117
四、雙組分信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)1910HK/RR 118
五、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CodY 119
六、Spx調(diào)節(jié)因子 121
參考文獻(xiàn) 122
第五章 炎癥與免疫 125
**節(jié) 宿主應(yīng)答豬鏈球菌感染的基因篩選 126
一、豬鏈球菌2型感染豬脾臟的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究 126
二、豬鏈球菌2型感染宿主豬的轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究 128
第二節(jié) TREM-1在豬鏈球菌2型感染中的作用及機(jī)制研究 131
一、TREM-1在豬鏈球菌2型感染中的作用及其應(yīng)答機(jī)制的研究 131
二、鼠TREM-1相互作用蛋白的篩選和鑒定研究 135
三、Actin激活TREM-1信號通路的研究 137
第三節(jié) S.suis誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)形成和逃避殺菌效應(yīng)及其機(jī)制的研究 139
一、NETs在S.suis感染中的功能研究 139
二、S.suis逃避NETs殺菌效應(yīng)的機(jī)制研究 141
三、S.suis誘導(dǎo)NETs形成機(jī)制的初步研究 144
第四節(jié) 表皮生長因子受體在豬鏈球菌2 型致腦膜炎過程中的作用及機(jī)制研究 147
參考文獻(xiàn) 155
第六章 豬鏈球菌分子靶標(biāo)的鑒定 158
**節(jié) 豬鏈球菌2型免疫原性蛋白的篩選和鑒定 158
一、免疫蛋白質(zhì)組學(xué)簡介 158
二、豬鏈球菌免疫原性蛋白鑒定 159
三、免疫原性蛋白的表面定位 162
四、免疫原性蛋白的體內(nèi)表達(dá) 162
第二節(jié) 應(yīng)用比較蛋白質(zhì)組學(xué)鑒定體內(nèi)誘導(dǎo)抗原 162
一、體內(nèi)誘導(dǎo)抗原的鑒定 162
二、體內(nèi)誘導(dǎo)抗原表達(dá)的驗證 163
第三節(jié) 利用反向疫苗學(xué)發(fā)掘保護(hù)性抗原 164
一、反向疫苗學(xué)研究策略 164
二、反向疫苗學(xué)方法鑒定抗原保護(hù)效力 165
第四節(jié) 保護(hù)性抗原的特性分析 167
一、保護(hù)性抗原HP0197特性分析 167
二、保護(hù)性抗原HP1036特性分析 167
三、保護(hù)性抗原Enolase特性分析 168
四、保護(hù)性抗原HP0272特性分析 168
五、細(xì)胞膜相關(guān)蛋白SSU0434特性分析 168
六、細(xì)胞膜相關(guān)蛋白SSU0482特性分析 168
七、細(xì)胞膜相關(guān)蛋白SSU1853特性分析 169
八、細(xì)菌保守性抗原6-磷酸葡萄糖脫氫酶（6PGD）的特性分析 170
九、保護(hù)性抗原提供高效保護(hù)效力的機(jī)制分析 170
參考文獻(xiàn) 171
第七章 豬鏈球菌病診斷新技術(shù) 172
**節(jié) 豬鏈球菌2型抗體膠體金檢測方法 172
一、莢膜多糖抗原的制備 172
二、膠體金的制備與試紙條組裝 173
三、膠體金試紙條效果的檢測 174
第二節(jié) 豬鏈球菌PCR檢測方法 176
一、PCR擴(kuò)增條件的優(yōu)化 176
二、PCR檢測方法敏感性與可靠性的驗證 178
第三節(jié) 豬鏈球菌2型分泌核酸酶A（SsnA）的鑒別診斷方法 180
一、SsnA重組蛋白的表達(dá)純化 181
二、SsnA蛋白ELISA方法的初步建立 182
第四節(jié) 豬鏈球菌2型基因缺失疫苗ΔGlnA/ECE1開發(fā)及其鑒別診斷分子標(biāo)識的研制 183
第五節(jié) 豬鏈球菌2型ELISA抗體檢測試劑盒 185
一、莢膜多糖抗原的制備及檢測 185
二、ELISA反應(yīng)條件的摸索 185
三、試劑盒其他試劑的制備及半成品檢驗 188
參考文獻(xiàn) 190
第八章 豬鏈球菌病新型疫苗及免疫預(yù)防 191
**節(jié) 豬鏈球菌病三價滅活疫苗 191
一、生產(chǎn)用菌株的選擇和確定及菌種的毒力標(biāo)準(zhǔn) 192
二、菌種的保存及使用代次 198
三、疫苗的安全檢驗 201
四、疫苗免疫效力研究 201
五、疫苗的保存期 203
第二節(jié) 豬鏈球菌病-副豬嗜血桿菌病二聯(lián)亞單位疫苗 204
一、生產(chǎn)用抗原的選擇和確定 205
二、菌種的毒力標(biāo)準(zhǔn) 207
三、制備疫苗菌種的保存及使用代次 208
四、疫苗的安全檢驗 208
五、疫苗免疫效力研究 209
六、疫苗的保存期 214
第三節(jié) 豬鏈球菌2型弱毒活疫苗 215
一、豬鏈球菌弱毒疫苗菌株的篩選 215
二、豬鏈球菌2型生物學(xué)特性鑒定 217
三、豬鏈球菌弱毒菌株毒力返強(qiáng)試驗研究 222
四、豬鏈球菌病活疫苗安全性試驗 227
五、豬鏈球菌病活疫苗產(chǎn)品的保存期試驗 228
第四節(jié) 豬鏈球菌-豬霍亂沙門氏菌三聯(lián)基因工程疫苗研究 229
一、重組菌株的構(gòu)建與鑒定 229
二、重組菌株免疫小鼠的攻毒保護(hù)效力試驗 232
參考文獻(xiàn) 235
附錄 236
附錄1 發(fā)表論文目錄 236
附錄2 獲得專利及獎勵 242
一、主要科技獎勵 242
二、其他主要獎勵和榮譽(yù) 242
三、獲得新獸藥注冊證書3項，并實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化 242
四、獲授權(quán)國家專利12項，其中發(fā)明專利10項 242
附錄3 術(shù)語表 244