章 緒論
第二章 基因克隆的四大要素
一、工具酶
二、載體
三、基因
四、受體細(xì)胞
五、實(shí)驗(yàn)過程中菌種的保存和鑒定的重要性
參考文獻(xiàn)
第三章 DNA文庫(kù)的構(gòu)建
一、基因組文庫(kù)的構(gòu)建
二、cDNA文庫(kù)的構(gòu)建
三、DNA和RNA純度鑒定和保存
四、反(逆)轉(zhuǎn)錄酶
五、兩種文庫(kù)的優(yōu)缺點(diǎn)及用途
六、基因文庫(kù)的篩選及應(yīng)用
參考文獻(xiàn)
第四章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)
一、PCR技術(shù)的原理
二、PCR體系
三、PCR條件的選擇
四、PCR的自動(dòng)化一一PCR儀
五、PCR引物設(shè)計(jì)。
六、耐熱DNA聚合酶
七、提高PCR特異性的措施
八、防止污染問題
九、幾種特殊的PCR
十、PCR技術(shù)的應(yīng)用
參考文獻(xiàn)
第五章 基因重組(克隆)方法
一、DNA連接酶
二、克隆方案
三、重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞
四、重組子的篩選和鑒定
參考文獻(xiàn)
第六章 DNA序列測(cè)定
一、DNA序列分析的基本步驟
二、Sangcr雙脫氧鏈終止法
三、MaXam—Gilben化學(xué)測(cè)序法
四、焦磷酸測(cè)序技術(shù)
五、DNA序列測(cè)定技術(shù)的發(fā)展
參考文獻(xiàn)
第七章 重組產(chǎn)物的表達(dá)、分析和純化
一、重組產(chǎn)物的表達(dá)系統(tǒng)
二、利用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)
三、真核表達(dá)系統(tǒng)的必要性及優(yōu)勢(shì)
四、表達(dá)蛋白的分離和鑒定
五、克隆的前沿技術(shù)
參考文獻(xiàn)
第八章 示蹤和雜交技術(shù)
一、分子雜交技術(shù)的基本原理
二、探針的標(biāo)記物和標(biāo)記方法
三、膜的選擇
四、雜交技術(shù)的應(yīng)用
參考文獻(xiàn)
第九章 遺傳多樣性研究中的分子生物學(xué)方法
一、DNA指紋圖譜
二、物理圖譜
三、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析
四、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA分析
五、核糖體rRNA基因分析
六、微衛(wèi)星標(biāo)記
參考文獻(xiàn)
第十章 真核基因表達(dá)調(diào)控的研究方法
一、DNase I 超敏感性分析
二、凝膠滯留法
三、足跡法
四、酵母雜交技術(shù)
五、免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀
參考文獻(xiàn)
第十一章 基因組學(xué)與蛋白質(zhì)組學(xué)中的生物技術(shù)
一、基因芯片技術(shù)
二、蛋白質(zhì)雙向電泳
三、質(zhì)譜技術(shù)
四、基因突變技術(shù)
五、噬菌體展示技術(shù)
六、基因表達(dá)系列分析
參考文獻(xiàn)
第十二章 生物技術(shù)中生物信息學(xué)的應(yīng)用
一、生物信息學(xué)
二、生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)
三、數(shù)據(jù)庫(kù)的搜索、序列比對(duì)及分析
四、生物信息學(xué)軟件
參考文獻(xiàn)
附錄：常用數(shù)據(jù)表
一、蛋白質(zhì)、核酸的換算
二、常用核酸的長(zhǎng)度與分子量
三、抗生素的儲(chǔ)存溶液配制
四、常用核酸研究的工具酶
五、常用測(cè)序引物
六、離心機(jī)轉(zhuǎn)速與相對(duì)離心力的換算
七、密碼子表
八、常見市售酸堿的濃度
九、常用兩性離子緩沖液的物性
十、常用克隆宿主菌株的基因型
十一、常用宿主菌的遺傳標(biāo)記
十二、生物信息學(xué)的相關(guān)術(shù)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)